科研宝典:各类病毒在科研中的使用技巧(值得收藏)

时间:2019-09-08 来源:www.feminologywiki.com

脑科学新闻2天前我想分享

件。

件是一个难点。

慢病毒属

表达开始于2-4天,并稳定表达很长一段时间。

腺病毒

1-2天后开始表达,持续7-14天

腺相关病毒

7-14天开始表达,

非过度细胞分裂可以长期表达。

此时,您可以为您的研究目的选择正确的产品。

一般建议在活体动物实验中使用慢病毒和腺相关病毒AAV。

慢病毒由于其高效的转染率、广谱的感染,适合于体外和体内实验,在基因功能研究中得到了广泛的应用,特别是在癌症研究领域。如果你想在肿瘤学领域了解更多慢病毒,点击慢病毒是如何应用于肿瘤研究的。

腺相关病毒(AAV)体积最小,载体容量最小,无致病性,具有良好的扩散作用,病毒滴度高,可在转染的宿主细胞中长期表达。AAV注射到动物体内后,通常在1-2周内开始表达。体内实验一般推荐感染后3-4周的第一批结果。AAV中的一类组织特异性AAV载体因其“高效的感染靶向调控”在不同组织中实现特异高效的表达而受到许多研究者的青睐。单击此处查看科学研究咖啡的专业测试。共享~~

一系列流行的组织特异性AAV载体试剂盒,如小胶质细胞,内皮细胞,肌肉,肝脏和视网膜细胞,目前正在免费使用。确定下面的二维码并申请免费试用~~

如何提高体内病毒感染的效率?

件,您可以获得相对更好的结果。

病毒类型

注射部位

病毒滴度

注射方法

检测时间

慢病毒

小鼠右侧皮层

2 + E9TU/mL的

每侧3个斑点,0.7μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留10分钟

5天

大鼠下橄榄体

1 + E8TU/mL的

1 + E9TU/mL的

1μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留5min

21天

大鼠丘脑

4 + E9TU/mL的

4个站点,3μL/站点

14天

小鼠海马齿状回

2 + E7TU/mL的

5 + E8TU/mL的

2μL/点。 0.5μL/min,针头保留5min

14天

大鼠海马CA1区

1.5 + E9TU/mL的

体积5μL,速度0.3μL/min

14天

鞘内注射大鼠

1 + E9TU/mL的

28天

大鼠坐骨神经

1.8 + E9TU/mL的

2μL,速度0.4μL/min,

离开针头2分钟。左侧

注射剂干扰慢病毒,右侧注射对照慢病毒。

28天

腺病毒

小鼠右心室

1.3 + E10PFU/mL的

3μL,速度0.2μL/min

8,10,14天

鞘内注射大鼠

1 + E10PFU/mL的

3天

AAV

小鼠大脑皮层

0.5-5 + E13vg/mL的

1.5μL/基因座,根据细胞核的坐标侧将3个位点注入皮质

4周

小鼠双侧皮质

1.49 + E12v.g/mL的

0.5μL/部位,速度30nL/min,针头保留10min

至少28天

小鼠双侧海马

1μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留10min

14天

小鼠双侧松果腺

1 + E12v.g/mL的

0.8-1μL/位,速度100-150nL/min,保留5min

小鼠脊髓注射

1 + E12v.g/mL的

8个站点,1μL/站点

30天

心血管系统

慢病毒

小鼠尾静脉注射

感染主动脉

100μL,7.6 + E7IFU /小鼠

28天

腺病毒

小鼠心肌

1 + E9PFU/mL的

5个站点,总体积20μL

7,14,28天

AAV

小鼠尾静脉注射

感染心肌

3.15 + E9,1 + E10

3.15 + E10,1 + E11

V.g /小鼠

不同的病毒剂量注射

将这些病毒株稀释20μL,

尾静脉注射

4周

小鼠左心室尖端

3 + E11v.g/mL的

1.5 + E9病毒,稀释至50μL

2周,4周,8周

慢病毒

小鼠尾静脉注射

5 + E7IU /小鼠

大鼠肝门静脉注射

3 + E8TU

每4天注射100μL,3 + E8TU 3次

26天

腺病毒

小鼠尾静脉注射

感染肝脏

将1 + E11vp病毒稀释至100μL

1天

大鼠尾静脉注射

感染肝脏

5 + E9PFU

14天

慢病毒

将肺注入小鼠尾静脉

1 + E8MOL /小鼠

使用30号针头,200μL超细胰岛素注射器,每周2次,1个月注射

42天

腺病毒

恒河猴定点注射

100μL

4周

AAV

呼吸道滴鼻法

1 + E11-12v.g/mL的

1 + E11-12v.g/mL的

1个月

以上介绍了如何在体内实验中选择病毒及其特征以及不同系统中推荐的注射剂量。接下来,我们将对您在病毒注射中经常遇到的表达不良和荧光问题提出疑问。

件。

用病毒注射的对照也是荧光的吗?

组织处理中常见的问题,如多聚甲醛浸泡时间过长和组织染色过于干燥,导致非特异性背景过高,建议重新改善组织处理过程。

您已经在身体实验中得到了关于工具病毒的问题,现在您可能需要将其付诸实践,但它缺少病毒产品。

第一福利子弹

Jikai基因慢病毒在有限的时间内正在全面展开。

福利第二弹

免费上网开放课程

解开对该国自然热点外生体研究的新思路

作为研究“新星”,外源机构近年来在国家自然科学基金项目中中标。 2018年,国家自然科学基金会相关外泌体共获得1.76亿元,比2017年增加40%至1.26亿元。出版的文章数量也有显着增加,并且有许多高质量的文章。据不完全统计,7月份中国外泌体和细胞外囊泡领域发表论文118篇。 5的IF> 10,31的10> IF> 5。

关于外泌体的研究,我相信你已经踩到很多坑并遇到很多问题。接下来的课程可以为您提供科学研究的途径。扫描代码注册~~

如果您想关注最新的科研进展,请关注我们↓↓↓↓

收集报告投诉

件。

件的探索和优化是一个难点。

慢病毒

表达在2-4天开始并且长时间稳定表达

腺病毒

开始表达1-2天,持续7-14天

腺相关病毒(AAV)

7-14天开始表达,

非过度细胞分裂可以长时间表达

此时,您可以选择适合您研究目的的产品。

通常建议使用慢病毒和腺相关病毒AAV进行体内动物实验。

慢病毒由于转染效率高,感染范围广,适合体外和体内实验,因此广泛应用于基因功能研究,尤其是癌症研究领域。如果您想了解有关肿瘤学领域的慢病毒的更多信息,请点击Lentiviruses如何应用于肿瘤研究。

腺相关病毒(AAV)体积最小,载体最小,无致病性,扩散效果好,病毒滴度高,可长期转染宿主细胞。将AAV注射到动物体内后,通常在约1-2周内开始表达。体内实验通常推荐感染后3-4周后的第一批结果。 AAV中的一类组织特异性AAV载体由于其“高效感染靶向调节”而在许多研究人员中受到青睐,以在不同组织中实现特异性和有效的表达。点击此处查看科研咖啡的亲测试。份额~~

一系列流行的组织特异性AAV载体试剂盒,如小胶质细胞,内皮细胞,肌肉,肝脏和视网膜细胞,目前正在免费使用。确定下面的二维码并申请免费试用~~

如何提高体内病毒感染的效率?

件,您可以获得相对更好的结果。

病毒类型

注射部位

病毒滴度

注射方法

检测时间

慢病毒

小鼠右侧皮层

2 + E9TU/mL的

每侧3个斑点,0.7μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留10分钟

5天

大鼠下橄榄体

1 + E8TU/mL的

1 + E9TU/mL的

1μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留5min

21天

大鼠丘脑

4 + E9TU/mL的

4个站点,3μL/站点

14天

小鼠海马齿状回

2 + E7TU/mL的

5 + E8TU/mL的

2μL/点。 0.5μL/min,针头保留5min

14天

大鼠海马CA1区

1.5 + E9TU/mL的

体积5μL,速度0.3μL/min

14天

鞘内注射大鼠

1 + E9TU/mL的

28天

大鼠坐骨神经

1.8 + E9TU/mL的

2μL,速度0.4μL/min,

离开针头2分钟。左侧

注射剂干扰慢病毒,右侧注射对照慢病毒。

28天

腺病毒

小鼠右心室

1.3 + E10PFU/mL的

3μL,速度0.2μL/min

8,10,14天

鞘内注射大鼠

1 + E10PFU/mL的

3天

AAV

小鼠大脑皮层

0.5-5 + E13vg/mL的

1.5μL/基因座,根据细胞核的坐标侧将3个位点注入皮质

4周

小鼠双侧皮质

1.49 + E12v.g/mL的

0.5μL/部位,速度30nL/min,针头保留10min

至少28天

小鼠双侧海马

1μL/部位,速度0.2μL/min,针头保留10min

14天

小鼠双侧松果腺

1 + E12v.g/mL的

0.8-1μL/位,速度100-150nL/min,保留5min

小鼠脊髓注射

1 + E12v.g/mL的

8个站点,1μL/站点

30天

心血管系统

慢病毒

小鼠尾静脉注射

感染主动脉

100μL,7.6 + E7IFU /小鼠

28天

腺病毒

小鼠心肌

1 + E9PFU/mL的

5个站点,总体积20μL

7,14,28天

AAV

小鼠尾静脉注射

感染心肌

3.15 + E9,1 + E10

3.15 + E10,1 + E11

V.g /小鼠

不同的病毒剂量注射

将这些病毒株稀释20μL,

尾静脉注射

4周

小鼠左心室尖端

3 + E11v.g/mL的

1.5 + E9病毒,稀释至50μL

2周,4周,8周

慢病毒

小鼠尾静脉注射

5 + E7IU /小鼠

大鼠肝门静脉注射

3 + E8TU

每4天注射100μL,3 + E8TU 3次

26天

腺病毒

小鼠尾静脉注射

感染肝脏

将1 + E11vp病毒稀释至100μL

1天

大鼠尾静脉注射

感染肝脏

5 + E9PFU

14天

慢病毒

将肺注入小鼠尾静脉

1 + E8MOL /小鼠

使用30号针头,200μL超细胰岛素注射器,每周2次,1个月注射

42天

腺病毒

恒河猴定点注射

100μL

4周

AAV

呼吸道滴鼻法

1 + E11-12v.g/mL的

1 + E11-12v.g/mL的

1个月

以上介绍了如何在体内实验中选择病毒及其特征以及不同系统中推荐的注射剂量。接下来,我们将对您在病毒注射中经常遇到的表达不良和荧光问题提出疑问。

件。

用病毒注射的对照也是荧光的吗?

组织处理中常见的问题,如多聚甲醛浸泡时间过长和组织染色过于干燥,导致非特异性背景过高,建议重新改善组织处理过程。

您已经在身体实验中得到了关于工具病毒的问题,现在您可能需要将其付诸实践,但它缺少病毒产品。

第一福利子弹

Jikai基因慢病毒在有限的时间内正在全面展开。

福利第二弹

免费上网开放课程

解开对该国自然热点外生体研究的新思路

作为研究“新星”,外源机构近年来在国家自然科学基金项目中中标。 2018年,国家自然科学基金会相关外泌体共获得1.76亿元,比2017年增加40%至1.26亿元。出版的文章数量也有显着增加,并且有许多高质量的文章。据不完全统计,7月份中国外泌体和细胞外囊泡领域发表论文118篇。 5的IF> 10,31的10> IF> 5。

关于外泌体的研究,我相信你已经踩到很多坑并遇到很多问题。接下来的课程可以为您提供科学研究的途径。扫描代码注册~~

如果您想关注最新的科研进展,请关注我们↓↓↓↓